技术小站 | CDC介绍
发布时间:2022年05月20日
发布人:市场部
补体依赖的细胞毒性(CDC)试验一般通过经典途径依靠抗体的介导来激活补体,形成溶膜复合物(MAC),对靶细胞进行杀伤。
补体的发现
Bordet于1889年发现血清中有两种物质作用于细菌:抗体使细菌凝集、补体使细菌溶解。
图一 补体的发现过程
认识补体
补体(Complement, C)非单一成分,是人和动物血清中一组与免疫功能有关,经活化后具酶活性的蛋白质,包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白。
1、参与补体经典激活途径的固有成分,按其被发现的先后分别命名为 C1、C2、...... C9;
2、补体活化后的裂解片段,以该成分的符号后面附加小写英文字母表示,如 C3a 、C3b 等;
3、肽段组成新的复合体,命名是各组分的数字和小写英文字母写在C的后面,如C4b与C2a结合成C4b2a;
4、具有酶活性的成分或复合物,在其符号上划一横线表示,如图片;
5、补体被灭活,前或后加i,如C3bi;
6、补体受体命名为CR1、CR2等。
补体的活化路径
经典途径(Classical Pathway)
C1开始,由抗原抗体复合物结合C1q启动激活的途径。
旁路途径(Alternative Pathway)
C3开始,由病原微生物等提供接触表面,而从C3开始激活的途径。
凝集素途径(Lectin Pathway)
C4开始,由凝集素结合至细菌启动激活的途径。
通过三种活化途径,补体会形成溶膜复合物(Membrane Attack Complex),造成抗原/病原体的细胞膜损伤。
图二 补体的活化路径
CDC实验步骤
图三 CDC实验步骤
1、将靶细胞覆于96孔平底板中;
2、将抗体样品添加到培养基;
3、添加培养基稀释后的补体,将其在37℃下培养一段时间;
4、进行测定。
表一 CDC相关实验条件
图四 澳能生物CDC数据(误差线短于数据点半径,无法显示)