技术小站 | 双特异性抗体简介

双特异性抗体（Bispecific antibodies, BsAbs）指可以特异性结合两个或两个以上的抗原表位的抗体，可以用于癌症、免疫失调、感染、移植排斥反应等领域。可以大致分为两类：IgG-like和non-IgG-like，前者抗体可激活Fc介导的相关功能，例如ADCC、CDC、ADCP等；后者则没有与Fc相关的区域，可以降低肺特异性免疫细胞的激活，缺点为半衰期短。本期将介绍一些针对实体瘤的BsAbs。

实体瘤

实体瘤的类型包含上皮组织来源的恶性肿瘤、肉瘤、成神经细胞瘤、肾母细胞瘤；主要由基质细胞（间充质干细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、周皮细胞、血液、淋巴血管网络）、炎症细胞、胞外基质组成了整个肿瘤微环境（TME）。肿瘤微环境对主要通过抑制相关淋巴细胞启动、减少效应/淋巴细胞浸润，来达到使肿瘤不易被清除的目的，因此如何使免疫细胞打入肿瘤内部、增加刺激杀伤肿瘤细胞的抗原，是治疗实体瘤的一种思路。

BsAbs

BsAbs主要通过召集免疫系统中，可以杀伤肿瘤的效应细胞，来引起肿瘤细胞的裂解。大部分BsAbs的结合位点都包含CD3，另外还有选用CD16、CD64、CD89等，并同时结合肿瘤特征抗原，来达到阻断相关信号通路、靶向血管生成、阻断细胞因子作用等，以实现限制肿瘤细胞生长。常被BsAbs利用的免疫细胞有：CTL、单核细胞、NK细胞、巨噬细胞、粒细胞等。

BiTE

BiTE（Bispecific T-cell engager）是由4种基因编码的单链氨基酸融合蛋白，以Blinatumomab（Amgen）为例，可以连接T细胞的CD3ε和B细胞的CD19，激活/增殖T细胞，并上调CD25、CD69、HLA-DR、细胞连接分子等，且可使一些炎症相关细胞因子释放（IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α），另外BiTE可以和T细胞、颗粒酶、穿孔素等形成复合物，来激活记忆T细胞介导的细胞死亡信号通路。Blinatumomab可以用于非霍奇金淋巴瘤（NHL）、慢性淋巴细胞白血病（CLL）、急性淋巴细胞白血病（ALL），但若疾病复发后，肿瘤细胞出现CD19缺失，则该药失效，另外一个缺点则是半衰期较短，大约2小时左右。类似药物还有靶向CD3和CD33的AMG330（Amgen）、靶向CD3和EpCAM的MEDI-565/MT111（Amgen）。

图一  BiTE作用示意图

图二  Blinatumomab作用示意图

TandAbs

TandAbs指Tandem diabodies，为串联双联抗体，可以分别与效应细胞和靶细胞二价结合，使T细胞或NK细胞杀伤肿瘤细胞，并且增强DC引导T细胞的效应。以AFM13（Affimed）为例，该抗体可以结合CD16A和CD30。CD16是一种IgG Fc域受体，参与ADCC效应，并在巨噬细胞和NK细胞中高表达，AFM13主要利用NK来攻击带有CD30的肿瘤细胞，可用于霍奇金淋巴瘤（HL）的治疗。

图三  TandAb示意图

图四  AFM13作用示意图

Triomab

Triomab由一半大鼠IgG2b和一半小鼠IgG2a组成，拥有3个结合位点：CD3、肿瘤抗原、和表达于DC、巨噬细胞、NK细胞的Fcγ受体（I、IIa、III亚型）。相关药物：靶向CD3和EpCAM的Catumaxomab（Trion）、靶向CD3和HER-2的Ertumaxomab（Fresenius Biotech）、靶向CD3和CD20的Bi20/FBTA05（Trion）等。

图五  Triomab结构示意图

图六  Catumaxomab作用示意图